Clostridium Difcile GDH, toksyna A i toksyna B Szybki test
Zamierzone użycie
GDH Clostridium difficile, szybki test kombinacji toksyny A i toksyny B jest testem wykrywania antygenu dehydrogenazy glutaminianowej i toksyn A i B. Test wykrywa antygen C. difficile, dehydrogenazy glutaminian , i potwierdza obecność toksycznego C. difficile poprzez wykrywanie toksyn A i B w próbkach stolca od osób podejrzanych o posiadanie C. difficile, która jest trudną chorobą. Test będzie służy jako dodatek do diagnozy Clostridium difficile. Podobnie jak w przypadku innych testów C. difficile, wyniki należy rozważyć w połączeniu z historią medyczną pacjenta.
STRESZCZENIE
Clostridium difficile to bakterie beztlenowe działające jako patogen oportunistyczny: rośnie w jelicie, gdy normalna flora została zmieniona przez leczenie antybiotykami.1,2,3 Toksynogenne szczepy Clostridium difficile powodują infekcje od łagodnej - biegunki do pseudomembranocznego zapalenia jelita grubego, potencjalnie prowadzącym do śmierci. Choroba jest spowodowana dwoma toksynami wytwarzanymi przez toksynogenne szczepy C.dificile: toksyna A (tkanka - niszcząca enterotoksyna) i toksyna B (cytotoksyna). Niektóre szczepy wytwarzają zarówno toksyny A, jak i B, niektóre inne wytwarzają tylko toksynę B. Potencjalna rola trzeciej toksyny w patogeniczności jest nadal dyskutowana. Wykazano, że zastosowanie dehydrogenazy glutaminianowej (GDH) jako markera antygenu proliferacji c.dificile jest bardzo skuteczne, ponieważ wszystkie szczepy wytwarzają dużą ilość tego enzymu.
Dlatego ten produkt obejmuje wykrywanie GDH Clostridium difficile i toksyny A/B, które mogą bardziej kompleksowo wykryć Clostridium difficile.
TESTPROCEDURA
Przed użyciem przynieś testy, próbki i/lub sterowanie do temperatury pokojowej (15 - 30 ° C).
- Usuń test z uszczelnionej torebki i umieść go na czystej, poziomej powierzchni. Oznacz urządzenie identyfikacją pacjenta lub kontroli. Aby uzyskać najlepsze wyniki, test należy przeprowadzić w ciągu jednej godziny.
- Przygotowanie okazu:
Odkręć nasadkę rurki pobierania próbki, a następnie losowo dźgnij pręt próbkowania do próbki stolca w co najmniej 3 różnych miejscach, aby zebrać w przybliżeniu kał (równoważny 1/4 grochu). Przytrzymaj rurki pobierające próbki za pomocą buforu ekstrakcyjnego pionowo, włóż pręt próbkowania, wyciśnij dno rurki. Dokładnie wymieszaj próbkę stołka z buforem, wstrząsając butelką przez kilka sekund.
- Procedura testowa:
- Dokręć nasadka na rurkę pobierającą próbkę, a następnie energicznie potrząśnij rurkę pobierającą próbkę, aby wymieszać próbkę i bufor ekstrakcyjny. Zostaw rurkę w spokoju na 2 minuty.
- Usuń małą pokrywkę u góry.
- Przytrzymaj butelkę w pozycji pionowej nad studnią próbki karty testowej, dostarcz 3 krople (około 90 μl) rozcieńczonej próbki stolca do studni (stawek) i uruchom timer.
Notatka: Unikaj pułapkowania pęcherzyków powietrza w studni (studni) i nie dodawaj żadnego rozwiązania do obszaru wyniku.
Gdy test zaczyna działać, kolor będzie migrował przez obszar wyniku w środku urządzenia.
- Poczekaj, aż pojawią się kolorowe opaski. Przeczytaj wynik między 5 - 10 minut. Silna pozytywna próbka może wcześniej wykazać wynik. Nie interpretuj wyniku po 15, test zaczyna działać, kolor będzie migruje przez obszar wyniku w środku urządzenia
Interpretacja wyników
Clostridium Dificile GDH
- Pozytywne (+):Pojawiają się dwa fioletowe czerwone opaski. Jeden znajduje się w obszarze wykrywalności (T), drugi znajduje się w obszarze kontroli jakości (C).
Notatka:Purple Czerwony pasek w obszarze wykrywalności (T) może pokazać zjawisko ciemnego i jasnego koloru. Jednak w określonym czasie obserwacji, niezależnie od koloru pasma, nawet bardzo słaby pasmo należy interpretować jako wynik pozytywny.
- Negatywne (-):Tylko fioletowy czerwonyband pojawia się w obszarze kontroli jakości (c). W obszarze wykrywania (T) nie znaleziono fioletowych czerwonych pasm. Wynik ujemny wskazuje na Clostridium difficile
- Nieważny:Brak fioletowego czerwonego opaski w obszarze kontroli jakości (c). Wskazuje nieprawidłowe działanie lub pogorszenie testu. W takim przypadku przeczytaj ponownie instrukcje ponownie i ponownie przetestuj nowym testem. Jeśli problem będzie się utrzymywał, powinieneś natychmiast przestać używać numeru partii i skontaktować się z lokalnym dostawcą.
Clostridium difficile Toksyna A i toksyna B
- Toksyna aPozytywny: Pojawia się kolorowa linia w obszarze linii sterującej (c), a kolorowa linia pojawia się w regionie linii testowej T1. Rezultat jest pozytywny w przypadku toksyny A Clostridium difficile i wskazuje na Clostridium difficile
- ToksynaB Pozytywny:Pojawi się kolorowa linia w obszarze linii sterującej (c), a kolorowa linia pojawia się w regionie linii testowej T2. Rezultat jest pozytywny dla pasma toksyny Clostridium difficile wskazuje na zakażenie Clostridium difficile.
- Toksyna a&B Pozytywny:Pojawi się kolorowa linia w obszarze linii kontrolnej (c), a dwie kolorowe linie powinny pojawić się w obszarach linii testowej T1and T2. Intensywności kolorów linii nie muszą się równać. Rezultat jest pozytywny dla toksyny A i toksyny B i wskazuje na Clostridium difficile
- Negatywne (-):Tylko fioletowy czerwonyband pojawia się w obszarze kontroli jakości (c). W obszarze wykrywalności (T1) i (T2) nie znaleziono fioletowych czerwonych pasm. Wynik ujemny wskazuje na Clostridium difficile
- Nieważny:Brak fioletowego czerwonego opaski w obszarze kontroli jakości (c). Wskazuje nieprawidłowe działanie lub pogorszenie testu. W takim przypadku przeczytaj ponownie instrukcje ponownie i ponownie przetestuj nowym testem. Jeśli problem będzie się utrzymywał, powinieneś natychmiast przestać używać numeru partii i skontaktować się z lokalnym dostawcą.
-
Charakterystyka wydajności
Czułość kliniczna, swoistość i dokładność
GDH Clostridium difficile, toksyna A i toksyna B Szybki test PCR zastosowano jako metodę odniesienia. Wyniki wykazały, że GDH Clostridium difficile, toksyna A i toksyna B Szybki test kombinacji miał wysoką czułość i swoistość.
Tabela:Clostridium difficile Gdh AntygenSzybkiTest vs.RT - PCR
Metoda
RT - PCR
Całkowite wyniki
Clostridium difficile Gdh Antygen SzybkiTest
Wyniki
Pozytywny
Negatywny
Pozytywny
120
3
123
Negatywny
6
312
318
Całkowity wynik
126
315
441
Czułość względna: 95,24%(95%CI: 89,92%～ 98,23%)
Względna swoistość: 99,05%(95%CI: 97,24%～ 99,80%)
Dokładność: 97,96%(95%CI: 96,16%～ 99,06%)
Tabela: Test antygenowy toksyny Clostridium vs.RT - PCR
Metoda
RT - PCR
Całkowite wyniki
Toksyna antygenowa Clostridium Toksyna
Wyniki
Pozytywny
Negatywny
Pozytywny
111
5
116
Negatywny
9
109
118
Całkowity wynik
120
114
234
Czułość względna: 92,50%(95%CI: 86,24%～ 96,51%)
Względna swoistość: 95,61%(95%CI: 90,06%～ 98,56%)
Dokładność: 94,02%(95%CI: 90,17%～ 96,69%)
Tabela: Test antygenowy Toksyny B Clostridium vs.RT - PCR
Metoda
RT - PCR
Całkowite wyniki
Test antygenowy Toksyny Clostridium
Wyniki
Pozytywny
Negatywny
Pozytywny
99
4
103
Negatywny
4
114
118
Całkowity wynik
103
118
221
Czułość względna: 96,12%(95%CI: 90,35%～ 98,93%)
Względna swoistość: 96,61%(95%CI: 91,55%～ 99,07%)
Dokładność: 96,38%(95%CI: 87,43%～ 95,10%)
Krzyż - Reaktywność
Przeprowadzono ocenę w celu ustalenia reaktywności krzyżowej GDH Clostridium difficile, szybkiego testu kombinacji toksyn A i toksyny B. Brak reaktywności krzyżowej przeciwko patogenom przewodu pokarmowego czasami występują jako następujące:
Campylobacter coli
Shigella Dysenteriae
Salmonella Enteritidis
Campylobacter Jejuni
Shigella Flexneri
Salmonella paratyphi
E.Coli O157: H7
Shigella Sonnei
Salmonella Typhi
H.Pylori
Salmonella Typhimurium
Staphylococcus aureus
Listeria monocytogenes
Shigella Boydii
Yersinia enterocolitica
