کلوسٹریڈیم ڈائیفلائل جی ڈی ایچ ، ٹاکسن اے اور ٹاکسن بی کومبو ریپڈ ٹیسٹ

مطلوبہ استعمال

کلوسٹریڈیم ڈفیسائل جی ڈی ایچ ، ٹاکسن اے اور ٹاکسن بی کومبو ریپڈ ٹیسٹ گلوٹامیٹ ڈیہائیڈروجنیز اینٹیجن اور ٹاکسن اے اور بی کی کھوج کے لئے ایک امتحان ہے۔ ، اور ٹاکسینک سی ڈفیسائل کی موجودگی کی تصدیق کرتا ہے جس میں سی ڈفیسائل ہونے کا شبہ ہے کہ یہ ایک مشکل بیماری ہے۔ یہ ٹیسٹ کلوسٹریڈیم ڈفیسائل کی تشخیص کے لئے ایک ضمیمہ کے طور پر کام کرے گا۔ جیسا کہ دوسرے سی ڈفیسائل ٹیسٹوں کی طرح ، نتائج کو مریض کی طبی تاریخ کے ساتھ مل کر غور کیا جانا چاہئے۔

خلاصہ

کلوسٹریڈیم ڈفیسائل ایک انیروبک بیکٹیریا ہے جو ایک موقع پرست روگزن کی حیثیت سے کام کرتا ہے: یہ آنتوں میں بڑھتا ہے جب اینٹی بائیوٹکس کے علاج کے ذریعہ عام پودوں کو تبدیل کیا جاتا ہے۔^1،2،3 کلوسٹریڈیم ڈفیسائل کے ٹاکسنجینک تناؤ ہلکے سے انفیکشن کا سبب بنتے ہیں - اسہال سے سیوڈومبرینس کولائٹس تک ، ممکنہ طور پر موت کا باعث بنتا ہے۔ بیماری دو ٹاکسن کی وجہ سے ہوتی ہے جو سی ڈفیسائل کے ٹاکسنجینک تناؤ کے ذریعہ تیار ہوتی ہے: ٹاکسن اے (ٹشو - نقصان دہ انٹروٹوکسن) اور ٹاکسن بی (سائٹوٹوکسن)۔ کچھ تناؤ دونوں ٹاکسن A اور B تیار کرتے ہیں ، کچھ دوسرے صرف ٹاکسن B تیار کرتے ہیں۔ روگجنکیت میں تیسرے ٹاکسن کے ممکنہ کردار پر ابھی بھی بحث کی جارہی ہے۔ گلوٹامیٹ ڈہائڈروجنیز (جی ڈی ایچ) کے سی ڈفیسائل پھیلاؤ کے اینٹیجن مارکر کے طور پر استعمال بہت موثر ثابت ہوا ہے کیونکہ تمام تناؤ اس انزائم کی اعلی مقدار پیدا کرتے ہیں۔

لہذا ، اس پروڈکٹ میں کلوسٹریڈیم ڈفیسائل جی ڈی ایچ اور ٹاکسن A/B کا پتہ لگانا شامل ہے ، جو کلوسٹریڈیم ڈفیسائل کو زیادہ جامع طور پر تلاش کرسکتا ہے۔

ٹیسٹطریقہ کار

استعمال سے پہلے کمرے کے درجہ حرارت (15 - 30 ° C) پر ٹیسٹ ، نمونے ، اور/یا کنٹرول لائیں۔

1. اس کے مہر بند تیلی سے ٹیسٹ کو ہٹا دیں ، اور اسے صاف ، سطح کی سطح پر رکھیں۔ مریض یا کنٹرول کی شناخت کے ساتھ آلہ کا لیبل لگائیں۔ بہترین نتائج کے لئے پرکھ ایک گھنٹہ کے اندر انجام دیا جانا چاہئے۔
2. نمونہ کی تیاری:

نمونہ جمع کرنے والی ٹیوب کی ٹوپی کو کھولیں ، پھر نمونے لینے کی چھڑی کو اسٹول کے نمونے میں کم سے کم 3 مختلف سائٹوں میں چھرا گھونپیں (ایک مٹر کے 1/4 کے برابر) تقریبا feces جمع کرنے کے لئے۔ نمونہ جمع کرنے والے نلکوں کو عمودی طور پر نکالنے والے بفر کے ساتھ تھامیں ، نمونے لینے کی چھڑی داخل کریں ، ٹیوب کے نیچے نچوڑ لیں۔ بفر کے ساتھ پاخانہ کا نمونہ کچھ سیکنڈ کے لئے بوتل کو ہلا کر اچھی طرح مکس کریں۔

3. پرکھ کا طریقہ کار:

• نمونہ جمع کرنے والی ٹیوب پر ٹوپی کو سخت کریں ، پھر نمونہ اور نکالنے والے بفر کو ملا دینے کے لئے نمونہ جمع کرنے والی ٹیوب کو بھرپور طریقے سے ہلائیں۔ ٹیوب کو 2 منٹ کے لئے تنہا چھوڑ دیں۔
• سب سے اوپر چھوٹے ڑککن کو ہٹا دیں۔
• بوتل کو عمودی پوزیشن میں ٹیسٹ کارڈ کے نمونے کے کنویں پر رکھیں ، نمونے کے کنویں (s) کو پتھر والے اسٹول کے نمونے کے 3 قطرے (تقریبا 90 90μl) فراہم کریں اور ٹائمر شروع کریں۔

نوٹ: نمونہ میں اچھی طرح سے ہوا کے بلبلوں کو پھنسانے سے گریز کریں ، اور نتائج کے علاقے میں کوئی حل شامل نہ کریں۔

جب ٹیسٹ کام کرنا شروع ہوتا ہے تو ، آلہ کے مرکز میں نتیجہ کے علاقے میں رنگ ہجرت کرے گا۔

• رنگین بینڈ (زبانیں) ظاہر ہونے کا انتظار کریں۔ نتیجہ 5 - 10 منٹ کے درمیان پڑھیں۔ ایک مضبوط مثبت نمونہ پہلے نتیجہ ظاہر کرسکتا ہے۔ نتائج کی ترجمانی 15 اے ایس کے بعد نہ کریں ٹیسٹ کام کرنے لگے ، رنگ آلے کے مرکز میں نتیجہ کے علاقے میں ہجرت کرے گا

نتائج کی ترجمانی

کلوسٹریڈیم ڈائیفلائل جی ڈی ایچ

• مثبت (+):دو جامنی رنگ کے ریڈ بینڈ ظاہر ہوتے ہیں۔ ایک پتہ لگانے کے علاقے (ٹی) میں واقع ہے ، دوسرا کوالٹی کنٹرول ایریا (سی) میں واقع ہے۔

نوٹ:پتہ لگانے والے علاقے (ٹی) میں جامنی رنگ کا سرخ بینڈ سیاہ اور ہلکے رنگ کے رجحان کو ظاہر کرسکتا ہے۔ تاہم ، مخصوص مشاہدے کے وقت کے دوران ، بینڈ کے رنگ سے قطع نظر ، یہاں تک کہ بہت کمزور بینڈ کو بھی ایک مثبت نتیجہ کے طور پر سمجھا جانا چاہئے۔

• منفی (-):کوالٹی کنٹرول ایریا (سی) میں صرف ایک جامنی رنگ کا ریڈ بینڈ ظاہر ہوتا ہے۔ پتہ لگانے والے علاقے (ٹی) میں کوئی ارغوانی رنگ کے سرخ بینڈ نہیں ملے تھے۔ ایک منفی نتیجہ کوئی کلوسٹریڈیم ڈفیسائل کی نشاندہی نہیں کرتا ہے
• غلط:کوالٹی کنٹرول ایریا (سی) میں ارغوانی رنگ کا سرخ بینڈ نہیں۔ ٹیسٹ کے غلط آپریشن یا بگاڑ کی نشاندہی کرتا ہے۔ اس معاملے میں ، ہدایات کو دوبارہ احتیاط سے پڑھیں اور ایک نئے ٹیسٹ کے ساتھ جواب دیں۔ اگر مسئلہ برقرار رہتا ہے تو ، آپ کو فوری طور پر بیچ نمبر کا استعمال بند کرنا چاہئے اور اپنے مقامی سپلائر سے رابطہ کرنا چاہئے۔

کلوسٹریڈیم ڈفیسائل ٹاکسن A اور ٹاکسن b

• ٹاکسن aمثبت: کنٹرول لائن ریجن (سی) میں رنگین لائن ظاہر ہوتی ہے ، اور ٹیسٹ لائن ریجن ٹی 1 میں رنگین لائن نمودار ہوتی ہے۔ نتیجہ کلوسٹریڈیم ڈفیسائل ٹاکسن A کے لئے مثبت ہے اور یہ کلوسٹریڈیم ڈفیسائل کا اشارہ ہے
• ٹاکسنB مثبت:کنٹرول لائن ریجن (سی) میں رنگین لائن ظاہر ہوتی ہے ، اور ٹیسٹ لائن ریجن ٹی 2 میں رنگین لائن نمودار ہوتی ہے۔ نتیجہ کلوسٹریڈیم ڈفیسائل ٹاکسن بینڈ کے لئے مثبت ہے جو کلوسٹریڈیم ڈفیسائل انفیکشن کا اشارہ ہے۔
• ٹاکسن a&B مثبت:کنٹرول لائن ریجن (سی) میں رنگین لائن نمودار ہوتی ہے ، اور ٹیسٹ لائن خطوں T1 اور T2 میں دو رنگین لائنیں ظاہر ہونی چاہئیں۔ لائنوں کی رنگین شدت کو میچ نہیں کرنا پڑتا ہے۔ نتیجہ ٹاکسن A & ٹاکسن B کے لئے مثبت ہے اور یہ کلوسٹریڈیم ڈفیسائل کا اشارہ ہے
• منفی (-):کوالٹی کنٹرول ایریا (سی) میں صرف ایک جامنی رنگ کا ریڈ بینڈ ظاہر ہوتا ہے۔ پتہ لگانے والے علاقے (T1) اور (T2) میں کوئی ارغوانی رنگ کے سرخ بینڈ نہیں ملے۔ ایک منفی نتیجہ کوئی کلوسٹریڈیم ڈفیسائل کی نشاندہی نہیں کرتا ہے
• غلط:کوالٹی کنٹرول ایریا (سی) میں ارغوانی رنگ کا سرخ بینڈ نہیں۔ ٹیسٹ کے غلط آپریشن یا بگاڑ کی نشاندہی کرتا ہے۔ اس معاملے میں ، ہدایات کو دوبارہ احتیاط سے پڑھیں اور ایک نئے ٹیسٹ کے ساتھ جواب دیں۔ اگر مسئلہ برقرار رہتا ہے تو ، آپ کو فوری طور پر بیچ نمبر کا استعمال بند کرنا چاہئے اور اپنے مقامی سپلائر سے رابطہ کرنا چاہئے۔

• کارکردگی کی خصوصیات

  کلینیکل حساسیت ، وضاحتی اور درستگی

  کلوسٹریڈیم ڈفیسائل جی ڈی ایچ ، ٹاکسن اے اور ٹاکسن بی کومبو ریپڈ ٹیسٹ نے پی سی آر کو حوالہ کے طریقہ کار کے طور پر استعمال کیا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ کلوسٹریڈیم ڈفیسائل جی ڈی ایچ ، ٹاکسن اے اور ٹاکسن بی کومبو ریپڈ ٹیسٹ میں اعلی حساسیت اور خصوصیت ہے۔

  جدول:کلوسٹریڈیم ڈفیسائل جی ڈی ایچ اینٹیجنتیزٹیسٹ بمقابلہrt - pcr  

  طریقہ		rt - pcr		کل نتائج
  کلوسٹریڈیم ڈفیسائل جی ڈی ایچ اینٹیجن تیزٹیسٹ	نتائج	مثبت	منفی
  	مثبت	120	3	123
  	منفی	6	312	318
  کل نتیجہ		126	315	441

  نسبتا حساسیت: 95.24 ٪ (95 ٪ CI: 89.92 ٪ ～ 98.23 ٪)

  متعلقہ مخصوصیت: 99.05 ٪ (95 ٪ CI: 97.24 ٪ ～ 99.80 ٪)

  درستگی: 97.96 ٪ (95 ٪ CI: 96.16 ٪ ～ 99.06 ٪)

  جدول: کلوسٹریڈیم ٹاکسن ایک اینٹیجن ریپڈ ٹیسٹ بمقابلہrt - pcr  

  طریقہ		rt - pcr		کل نتائج
  کلوسٹریڈیم ٹاکسن ایک اینٹیجن ریپڈ ٹیسٹ	نتائج	مثبت	منفی
  	مثبت	111	5	116
  	منفی	9	109	118
  کل نتیجہ		120	114	234

  نسبتا حساسیت: 92.50 ٪ (95 ٪ CI: 86.24 ٪ ～ 96.51 ٪)

  متعلقہ وضاحت: 95.61 ٪ (95 ٪ CI: 90.06 ٪ ～ 98.56 ٪)

  درستگی: 94.02 ٪ (95 ٪ CI: 90.17 ٪ ～ 96.69 ٪)

  جدول: کلوسٹریڈیم ٹاکسن بی اینٹیجن ریپڈ ٹیسٹ بمقابلہrt - pcr  

  طریقہ		rt - pcr		کل نتائج
  کلوسٹریڈیم ٹاکسن بی اینٹیجن ریپڈ ٹیسٹ	نتائج	مثبت	منفی
  	مثبت	99	4	103
  	منفی	4	114	118
  کل نتیجہ		103	118	221

  نسبتا حساسیت: 96.12 ٪ (95 ٪ CI: 90.35 ٪ ～ 98.93 ٪)

  متعلقہ وضاحت: 96.61 ٪ (95 ٪ CI: 91.55 ٪ ～ 99.07 ٪)

  درستگی: 96.38 ٪ (95 ٪ CI: 87.43 ٪ ～ 95.10 ٪)

  کراس - رد عمل

  کلوسٹریڈیم ڈفیسائل جی ڈی ایچ ، ٹاکسن اے اور ٹاکسن بی کومبو ریپڈ ٹیسٹ کی کراس ری ایکٹیویٹی کا تعین کرنے کے لئے ایک تشخیص کیا گیا۔ معدے کے پیتھوجینز کے خلاف کوئی کراس رد عمل کبھی کبھار مندرجہ ذیل کے طور پر موجود ہے:

   

  کیمیلوبیکٹر کولی	شیگیلا dysenteriae	سالمونیلا انٹریٹائڈس
  کیمیلوبیکٹر جیجیونی	شیگیلا فلیکسری	سالمونیلا پیراٹیفی
  E.Coli O157: H7	شیگیلا سونی	سالمونیلا ٹائفی
  H.Pylori	سالمونیلا ٹائفیموریم	اسٹیفیلوکوکس اوریئس
  لیسٹریا monocytogenes	شیگیلا بوائےڈی	یرسینیا انٹرکولیٹیکا

• 
• 
• 
•